Preuve d’un site de liaison à l’œstradiol spécifique sur les membranes hypophysaires du rat.
En utilisant des adénohypophyses de rats femelles normaux, nous démontrons que l’œstradiol lie les membranes pituitaires à une population homogène de sites avec une forte affinité [constante de dissociation (Kd) = 0,041 +/- 0,014 nM; n = 6] et de faible capacité [liaison maximale (Bmax) = 13,6 +/- 5,6 fmol / mg de protéine]. La liaison est thermolabile. Des expériences d’association montrent que les meilleures conditions expérimentales sont une incubation d’une nuit à 0 C. Lorsque la quantité de protéines est augmentée de plus de 0,3 mg / ml de suspension membranaire, la liaison est rapidement non linéaire. La présence de 0,5 M de leupeptine n’améliore pas la liaison. Un lavage extensif des membranes ne diminue pas la quantité de sites, ce qui indique que la liaison n’est pas attachée de manière lâche aux membranes. Entre parenthèses, il convient de noter que la fraction membranaire était dépourvue du marqueur enzymatique cytosolique, la lactate déshydrogénase. La liaison est spécifique pour les composés oestrogéniques. Lorsque la liaison spécifique à 100% a été déterminée en présence de diéthylstilbestrol 10 (-6) M, la liaison totale du 17β-oestradiol, de l’œstrone et de l’œstriol a déplacé la liaison totale de 110, 80 et 75%, respectivement. Ni le 4-OH-tamoxifène ni la dihydrotestostérone, la progestérone ou le cortisol n’ont déplacé la liaison. Pris ensemble, ces données plaident en faveur de la présence de sites de reconnaissance membranaire spécifiques pour l’œstradiol dans l’hypophyse du rat.
Bression D, Michard M, Le Dafniet M, Pagesy P, Peillon F.